অনেক গবেষণা এবং শিল্প গবেষণাগারে সাধারণত দেখা যায় এমন একটি বৈজ্ঞানিক যন্ত্রগুলির মধ্যে একটি স্পেকট্রোফোটোমিটার। স্পেকট্রফোটোমিটারগুলি পদার্থবিজ্ঞান, আণবিক জীববিজ্ঞান, রসায়ন এবং জৈব রসায়নের ল্যাবগুলিতে গবেষণার জন্য ব্যবহৃত হয়। সাধারণত, নামটি আল্ট্রাভায়োলেট-দৃশ্যমান (ইউভি-ভিস) স্পেকট্রোস্কোপিকে বোঝায়।
আলোর শক্তি তার তরঙ্গদৈর্ঘ্যের উপর নির্ভর করে, সাধারণত ল্যাম্বদা হিসাবে মনোনীত হয়। বৈদ্যুতিন চৌম্বকীয় বর্ণালী তরঙ্গদৈর্ঘ্যের এক বিস্তৃত পরিসীমা জুড়ে বিস্তৃত হয়েছে, বেশিরভাগ পরীক্ষাগার কেবল সেগুলির একটি ছোট ভগ্নাংশ পরিমাপ করতে পারে। ইউভি-ভিজ স্পেকট্রস্কোপি ইউভি আলোক পরিমাপের জন্য 200 এবং 400 ন্যানোমিটার (এনএম) এর মধ্যে এবং দৃশ্যমান বর্ণালীতে প্রায় 750 এনএম পর্যন্ত পরিমাপ করে।
ইউভি-ভিজ স্পেকট্রোস্কোপির জন্য, নমুনাগুলি সাধারণত কুয়েটস নামে পরিচিত ছোট পাত্রে থাকে এবং পরিমাপ করা হয়। দৃশ্যমান বর্ণালীতে ব্যবহার করা থাকলে এগুলি প্লাস্টিকের হতে পারে তবে ইউভি পরিমাপের জন্য ব্যবহৃত হলে কোয়ার্টজ বা সিলিকা হওয়া দরকার। কিছু মেশিন রয়েছে যা কাচের টেস্ট টিউবগুলি ব্যবহার করতে পারে।
দৃশ্যমান স্পেকট্রোস্কোপি প্রায়শই রঙিন রঙের জন্য শিল্পে ব্যবহৃত হয়। এই পদ্ধতিটি ব্যবহার করে, নমুনাগুলি 400-700 এনএম থেকে একাধিক তরঙ্গদৈর্ঘ্যে পরিমাপ করা হয় এবং তাদের শোষণের প্রোফাইলগুলি একটি মানের সাথে তুলনা করা হয়। এই কৌশলটি প্রায়শই টেক্সটাইল এবং কালি প্রস্তুতকারকদের দ্বারা ব্যবহৃত হয়। ইউভি-ভিজ স্পেকট্রোস্কপির অন্যান্য বাণিজ্যিক ব্যবহারকারীদের মধ্যে ফরেনসিক পরীক্ষাগার এবং প্রিন্টার রয়েছে।
জৈবিক এবং রাসায়নিক গবেষণায়, সমাধানগুলি প্রায়শই একটি নির্দিষ্ট তরঙ্গদৈর্ঘ্যে তাদের আলোক শোষণের ডিগ্রি পরিমাপ করে পরিমাপ করা হয়। বিলুপ্তি গুণফল বলা একটি মান যৌগিক ঘনত্ব গণনা করতে ব্যবহৃত হয়। উদাহরণস্বরূপ, আণবিক জীববিজ্ঞানের পরীক্ষাগারগুলি ডিএনএ বা আরএনএ নমুনাগুলির ঘনত্ব পরিমাপ করতে বর্ণালী ফোটোমিটার ব্যবহার করে। তাদের মাঝে মাঝে একটি ন্যানোড্রপ ™ স্পেকট্রোফোটোমিটার নামে একটি উন্নত মেশিন থাকে যা traditionalতিহ্যবাহী স্পেকট্রোফোটোমিটারগুলির তুলনায় নমুনার পরিমাণের একটি ভগ্নাংশ ব্যবহার করে।
পরিমানের বৈধতা পাওয়ার জন্য, নমুনাকে অবশ্যই বিয়ার-ল্যাম্বার্ট আইন মানতে হবে। এর জন্য প্রয়োজন যে শোষণটি কোয়েটের পাথ দৈর্ঘ্যের এবং যৌগিক শোষণের সাথে সরাসরি সমানুপাতিক হতে হবে। বিলুপ্তকরণ সহগের টেবিলগুলি অনেকের জন্য উপলব্ধ, তবে সমস্ত নয়, যৌগিক ounds
অনেক রাসায়নিক এবং এনজাইমেটিক প্রতিক্রিয়া সময়ের সাথে সাথে রঙ পরিবর্তন করে এবং বর্ণালী পরিবর্তনগুলি পরিমাপের জন্য খুব দরকারী। উদাহরণস্বরূপ, পলিফেনল অক্সিডেস এনজাইমগুলি ফিনোলিক যৌগগুলির ফলের বাদামি জালিতকরণের সমাধান দেয় এবং দৃশ্যমান রঙিনগুলির জন্য পরিষ্কার সমাধান পরিবর্তন করে। রঙ পরিবর্তন হওয়ার সাথে সাথে শোষণের বৃদ্ধি পরিমাপ করে এ জাতীয় প্রতিক্রিয়াগুলি অনুমান করা যায়। আদর্শভাবে, পরিবর্তনের হার লিনিয়ার হবে এবং এই ডেটা থেকে কেউ গণনা করতে পারে। এনজাইমের জন্য একটি সুনির্দিষ্ট তাপমাত্রার আদর্শে প্রতিক্রিয়াগুলি সম্পাদন করার জন্য আরও উন্নত বর্ণালম্বী একটি তাপমাত্রা-নিয়ন্ত্রিত কুয়েট ধারক রাখবেন।
মাইক্রোবায়োলজিকাল এবং মলিকুলার বায়োলজি ল্যাবরেটরিগুলি ব্যাকটিরিয়ার সংস্কৃতির বৃদ্ধি পরিমাপ করতে ঘন ঘন একটি বর্ণালী ফোটোমিটার ব্যবহার করে। ডিএনএ ক্লোনিং পরীক্ষাগুলি প্রায়শই ব্যাকটিরিয়ায় করা হয় এবং নির্দিষ্ট কিছু পদ্ধতি কখন কার্যকর করা যায় তা জানতে গবেষকদের সংস্কৃতির বিকাশ পর্যায়টি পরিমাপ করা প্রয়োজন। তারা শোষণটি পরিমাপ করে, যা একটি বর্ণালোকের পরিমণ্ডলে অপটিক্যাল ঘনত্ব (ওডি) হিসাবে পরিচিত। ওডি থেকে কেউ বলতে পারেন যে ব্যাকটেরিয়াগুলি সক্রিয়ভাবে বিভাজন করছে বা তারা মারা যেতে শুরু করছে কিনা।
স্পেকট্রোফোটোমিটারগুলি একরঙার মাধ্যমে তরঙ্গদৈর্ঘ্যের একটি অ্যারের আলোকিত করার জন্য একটি আলোক উত্স ব্যবহার করে। এই ডিভাইসটি তখন আলোর একটি সংকীর্ণ ব্যান্ড প্রেরণ করে এবং বর্ণালোকের পরিমাপক নমুনার মধ্য দিয়ে যাওয়া আলোর তীব্রতার সাথে তুলনামূলক যৌগের মধ্য দিয়ে যাওয়ার সাথে তুলনা করে। উদাহরণস্বরূপ, যদি কোনও যৌগিক ইথানল দ্রবীভূত হয় তবে রেফারেন্সটি ইথানল হবে। ফলাফলটি তাদের মধ্যে পার্থক্যের শোষণের ডিগ্রি হিসাবে প্রদর্শিত হয়। এটি নমুনা যৌগিক শোষণ ইঙ্গিত দেয়।
এই শোষণের কারণ হ'ল অতিবেগুনী এবং দৃশ্যমান আলো উভয়েরই রাসায়নিকগুলিকে আরও বেশি শক্তির স্তরে উত্তেজিত করার পর্যাপ্ত শক্তি রয়েছে। এই উত্তেজনার ফলে একটি উচ্চতর তরঙ্গদৈর্ঘ্য হয়, যা শোভন তরঙ্গদৈর্ঘ্যের বিরুদ্ধে প্লট করা হলে দৃশ্যমান। বিভিন্ন তরঙ্গ দৈর্ঘ্যের বিভিন্ন অণু বা অজৈব যৌগগুলি শক্তি শোষণ করে। দৃশ্যমান পরিসরে সর্বাধিক শোষণকারীদের মানব চোখ দ্বারা বর্ণযুক্ত হিসাবে দেখা যায়।
যৌগগুলির সমাধানগুলি পরিষ্কার হতে পারে তবে ইউভি সীমার মধ্যে শোষিত হয়। এই ধরনের যৌগগুলিতে সাধারণত ডাবল বন্ড বা সুগন্ধযুক্ত রিং থাকে। কখনও কখনও শোষণের ডিগ্রি তরঙ্গদৈর্ঘ্যের বিরুদ্ধে প্লট করা হয় যখন এক বা একাধিক সনাক্তযোগ্য শৃঙ্গ আছে। যদি তা হয় তবে এটি পরিচিত রেফারেন্স প্লটের বিপরীতে প্লটের আকারের তুলনা করে কিছু যৌগ শনাক্তকরণে সহায়তা করতে পারে।
দুটি ধরণের ইউভি-ভিস স্পেকট্রোফোটোমিটার মেশিন, একক-মরীচি এবং ডাবল-মরীচি রয়েছে। এগুলি কীভাবে রেফারেন্স এবং পরীক্ষার নমুনার মধ্যে আলোর তীব্রতা পরিমাপ করে তার মধ্যে পৃথক। ডাবল-মরীচি মেশিনগুলি রেফারেন্স এবং পরীক্ষার যৌগটি একই সাথে পরিমাপ করে, যখন একক-মরীচি মেশিনগুলি পরীক্ষার যৌগ যুক্ত হওয়ার আগে এবং পরে পরিমাপ করে।